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做好琼脂糖凝胶电泳实验的方法是什么

作者:标准菌株生产厂家 来源:www.njlezhen.com 发布于:2018-5-17 8:55:06 点击量:

    琼脂糖凝胶电泳实验的介质是琼脂糖,实验之前需要准备干净的电泳槽,这种实验都将病毒等物质进行分解。实验过程中需要用到染色剂,使RNA着色,能够便于人们观察到它在显微镜下的形态,另外,实验中的仪器一定不能受到DNA酶的污染,否则就会分解DNA,不便于实验。
 


    用1×TAE电泳缓冲液制作琼脂糖凝胶,加1×TAE电泳缓冲液至液面覆盖凝胶。在超净工作台上,用移液器吸取总RNA样品4μl于封口膜上。在实验台上再加入5μl1×TAE电泳缓冲液及1μl的10X载样缓冲液,混匀后,小心加入点样孔。

    打开电源开关,调节电压至100V,使RNA由负极向正极电泳,约30min后将凝胶放入EB染液中染色5min,用清水稍微漂洗。在紫外透射检测仪上观察RNA电泳结果。

    操作:将制胶用具用70%乙醇冲冼一遍,晾干备用,配制琼脂糖凝胶。称取0.5g琼脂糖,置干净的100ml锥形瓶中,加入40ml蒸馏水,微波炉内加热使琼脂糖彻底溶化均匀。待胶凉至60--70℃,依次向其中加入9ml甲醛、5ml10XMOPS缓冲液和0.5ul溴化乙锭,混合均匀,灌制琼脂糖凝胶。




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