金黄色葡萄球菌检验
发布日期：2020-07-20 18:31:52 浏览次数：0
金黄色葡萄球菌检验
1主题内容与适用范围
本文规定了食品中金黄色葡萄球菌的检验方法。
本文适用于航空食品的检验。
2设备和材料
吸管（1ml、10ml）、恒温培养箱（36±1℃）、冰箱、均质器、振荡器、平皿、稀释瓶、天平、显微镜、接种棒等
3培养基和试剂
普通肉汤培养基、胰蛋白胨大豆肉汤、Baird－Prker琼脂平板、缓冲蛋白胨水（BP）、凝固酶试验冻干血浆
4检验程序（非选择性增菌法）
金黄色葡萄球菌检验程序如下：
检样25g+225mlBP胨水
10ml匀液+10ml双料胰胨肉汤
上述混合液+20ml20％NaCl单料胰胨肉汤
36±1℃2h
B-P平板
36±1℃24h
36±1℃48h
挑可疑菌落，移种到肉汤培养基
36±1℃24h
观察溶血
涂片染色
凝固酶试验
报告
5操作步骤
5.1称取25g固体样品；吸取25mL液体样品，加入225mLBP胨水，固体样品研磨或置均质器中制成混悬液。
5.2吸取10mL上述混悬液，接种于10mL双料胰蛋白胨大豆肉汤中，置36±1℃培养2h。
5.3再加入20ml含20％NaCl的单料胰蛋白胨大豆肉汤，置36±1℃培养24±2h。
5.4划线转种2个表面干燥的Baird－Parker琼脂平板上，36±1℃培养46±2h。
5.5挑取可疑菌落移种到肉汤培养基中，置36±1℃温箱培养24h。
5.6取肉汤培养物0.3ml同0.5ml凝固酶试验冻干血浆于8mm*100mm试管内充分混合，置36±1℃培养，定时观察是否有凝块形成，至少观察6h，以内容物完全凝固，使试管倒置或倾斜时不流动为阳性。试验中需同时做已知阳性和阴性对照。对可疑结果，应进行革兰氏染色、镜检和其他辅助试验。
5.7本菌为革兰氏阳性球菌，排列是葡萄球状，无芽胞，无荚膜，致病性葡萄球菌菌体较小，直径约为0.5～1μm。在Baird－Parker平板上为圆形、光滑凸起、湿润、直径为2～3mm，颜色呈灰色到黑色，边缘为淡色，周围为一混浊带，在其外层有一透明圈。用接种针接触菌落似有奶油树胶的硬度，偶然会遇到非脂肪溶解的类似菌落；但无混浊带及透明圈。
5.8报告结果
如发现有凝固酶试验阳性的菌落，即报告1g(ml)食品中有金黄色葡萄球菌存在，否则为阴性。
注：本文参照SN0172-92《出口食品中金黄色葡萄球菌检验方法》
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