【主要成分】
特殊营养物质、显色剂、琼脂、pH 7.0-7.2
【原理】
蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素,氯化钠可维持均衡的渗透压,琼脂是培养基的凝固剂,抑制剂抑制杂菌的生长,酚红是pH指示剂,发酵糖产酸的菌呈黄色,混合色素对应的酶发生特异性反应,水解底物,释放出显色基团。
【用途】
用于快速、准确检测大肠菌群,培养24小时,大肠菌群显蓝绿色。用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大肠菌群的快速检测。大肠菌群显蓝绿色,其它菌显黄色或无色,革兰氏阳性菌被抑制。
【贮藏】
制备好的平板应立即使用,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8 ℃,注意避光保存。
【使用方法】
称取本品 47.9g 加入 1000ml 蒸馏水,加热溶解并不停搅拌,煮沸不要超过 1 分钟。分装三角瓶,116 ℃ 高压灭菌 15 分钟。取 1ml 制备好的样品液加入直径为 9cm 无菌平皿中心,倾入冷却至 45 -50 ℃ 培养基约15ml,混匀。
凝固后,36 ± 1 ℃ 倒置培养18~24h 。或冷却至 45-50 ℃时,倾入无菌平皿,琼脂完全凝固后,在 37 ℃的培养箱中倒置放置 1-2 小时,加入适当稀释度的样品液 1ml,涂布于培养基上,36 ± 1 ℃培养 18~24h 。
【操作步骤】
1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液。
2、取样品液1ml 加入冷却至45-50℃显色培养基中混匀或涂布于平板上。
3、36±1℃ 培养18~24h,选用有30~200个菌落的平板,计数平板上出现的典型大肠菌群菌落。大肠菌群典型菌落为蓝绿色,其它细菌为无色或黄色菌落。
总大肠菌群 = 蓝绿色菌落
4、对可疑大肠菌群菌落可划线接种到营养琼脂平板上,36±1℃ 培养12-16小时,挑取单菌落做大肠菌群BGLB发酵试验。
【方法的局限性】
本培养基鉴定 大肠菌群 ,少数情况下可能会出现假阳性,但不会出现假阴性,有时可能需做其它补充试验。
【典型特征】
大肠菌群典型菌落为蓝绿色,其它细菌为无色或黄色菌落。
