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工业微生物菌种选育的步骤有哪些?有这些方法来进行分离和纯化!

发布日期:2020-11-19 08:59:09 浏览次数:0

  工业微生物菌种在使用之前,往往需要经历选育这个步骤,目的是为了能够挑选到更适合我们使用的微生物菌种,那么选育的步骤是什么呢?分别是采样、增殖培养、纯种分离、以及生产性能的测定等等几个步骤。并且在使用的时候,还需要对所选用的菌种进行分离和纯化。在文章中,小编就围绕着工业微生物菌种选育的步骤,以及它的分离和纯化这两方面来给大家做一个详细的介绍。
 

 

工业微生物菌种选育的步骤:

  1、采样
 
  采样地点的确定要根据筛选的目的、微生物的分布概况及菌种的主要特征与外界环境关系等,进行综合、具体地分析来决定。如果预先不了解某种生产菌的具体来源,一般可从土壤中分离。
 
  采样的方法多是在选好地点后,用小铲去除表土,取离地面5-15厘米处的土壤几十克,盛入预先消毒好的牛皮纸袋或塑料袋中,扎好,记录采样时间、地点、环境情况等,以备考查。
 
  2、增殖培养
 
  收集到的样品,如含目标工业微生物菌种较多,可直接进行分离。如果样品含目标菌种很少,就要设法增加该菌的数量,进行增殖培养。所谓增殖培养就是给混合菌群提供一些有利于所需菌株生长或不利于其它菌型生长的条件,以促使目标菌株大量繁殖,从而有利于分离它们。
 
  3、纯种分离
 
  通过增殖培养还不能得到微生物菌种的纯种,因为生产菌在自然条件下通常是与各种菌混杂在一起的,所以有必要进行分离纯化,才能获得纯种。纯种分离方法常选用单菌落分离法。把菌种制备成单孢子或单细胞悬浮液,经过适当的稀释后,在琼脂平板上进行划线分离。
 
  4、生产性能的测定
 
  由于纯种分离后,得到的工业微生物菌种数量非常大,如果对每一菌株都作全面或精确的性能测定,工作量十分巨大,而且是不必要的。一般采用两步法,即初筛和复筛,经过多次重复筛选,直到获得1-3株较好的菌株,供发酵条件的摸索和生产试验,进而作为育种的出发菌株。
 

 

微生物菌种分离和纯化的方法:

  1、倾注平板法
 
  首先把微生物菌种的悬液通过稀释,取一定量的稀释液与熔化好的保持在40-50℃左右的营养琼脂培养基充分混合,然后把这混合液倾注到无菌的培养皿中,待凝固之后,把这平板倒置在恒箱中培养。单一细胞经过多次增殖后形成一个菌落,取单个菌落制成悬液,重复上述步骤数次,便可得到纯培养物。
 
  2、涂布平板法
 
  首先把微生物菌种的悬液通过适当的稀释,取一定量的稀释液放在无菌的已经凝固的营养琼脂平板上,然后用无菌的玻璃刮刀把稀释液均匀地涂布在培养基表面上,经恒温培养便可以得到单个菌落。
 
  3、平板划线法
 
  平板划线法非常简单的分离微生物菌种的方法,用无菌的接种环取培养物少许在平板上进行划线。划线的方法很多,常见的比较容易出现单个菌落的划线方法有斜线法、曲线法、方格法、放射法、四格法等。
 
  当接种环在培养基表面上往后移动时,接种环上的菌液逐渐稀释,然后在所划的线上分散着单个细胞,经培养,每一个细胞长成一个菌落。
 

 
  综上所述,在看完文章之后,大家对于微生物菌种的相关知识应该都有了一个了解了,如果大家还有什么疑惑的话,可以随时来咨询我们!