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平板培养基的制备流程,制备过程中要注意什么问题?

发布日期:2021-08-17 15:11:52 浏览次数:0

  1、培养基配选定

  同种培养基配同著作某些差别除所用标准应严格按其规定进行配制外般均应尽量收集关资料加比较核再依据自使用目加选用记录其源

  2、培养基制备记录

  每制备培养基均应记录包括培养基名称配及其源各种份牌号终pH值、消毒温度间制备期制备者等记录应复制份原记录保存备查复制记录随制培养基同存放、防发混乱

  3、培养基称取

  培养基各种必须精确称取并要注意防止错乱完要断配置于傍侧每称完种即配面军做记号并所需称取药品取齐置于左侧每种称取完毕即移放于右侧完全称取完毕应进行检查

  4、培养基各份混合溶化

  培养基所用化药品均应化纯使用蒸煮锅铜锅或铁锅防微量铜或铁混入培养基使细菌易使用锈钢莴加热溶化放入烧杯或烧瓶置高压蒸汽灭菌器或流蒸汽消毒器蒸煮溶化锅溶化、先用温水加热并随扰、防焦化、发现焦化现象、该培养基即能使用应重新制备待部固体溶化再用较火力使所完全溶化迄至煮沸琼脂溶化用另部水溶化其两溶液充混合加热溶化程蒸发丢失水必须加补足

  5、培养基pH初步调

  培养基加热消毒程、pH所变化培养基各完全溶解应进行PH初步调例牛肉浸液约降低pH0.2肠浸液pH却显著升高步骤操作者应随注意探索经验、期能掌握培养基终PH保证培养基质量PH调整应培养基煮沸数钟利培养基沉淀物析

  6、培养基滤澄清

  液体培养基必须绝澄清琼脂培养基应透明显著沉淀 须要采用滤或其澄清达项要求般液体培养基用滤纸滤滤纸应折叠折扇或漏斗形避免液压均匀引起滤纸破裂

  琼脂培养基用清洁白色薄绒布趁热滤亦用间夹薄层吸水棉双层纱布滤新制肉、肝、血土豆等浸液、则须先用绒布碎渣滤再用滤纸反复滤滤能达澄清要求、则须用蛋清澄清即冷却至55~60°C培养基放入三角烧瓶内装入量超烧瓶容量1/2每1000ml培养基加入1~2鸡蛋蛋白强力振摇3~5钟置高压蒸汽灭菌器、121°C加热20钟、取趁热绒布滤即

  7、培养基装

  培养基装应按使用目要求装于试管、烧瓶等适容器内装量超容器装盛量2/3容器口用垫防湿纸棉塞封堵其外须用防水纸包扎(现试管般用螺旋盖者)装能使用半自或电定量装器装琼脂斜面培养基装量应能形2/3底层1/3斜面量洽装容器应预先清洗干净并经干烤消毒利于培养基彻底灭菌每批培养基应另外装20ml培养基于玻璃瓶随该批培养基同灭菌测定该批培养基终pH用

  8、培养基灭菌

  般培养基采用121°C高压蒸汽灭菌15钟各种培养基制备特殊规定即用灭菌

  某些畏热糖类应另行配20%或更高浓液滤或间歇灭菌消毒再用菌操作技术、定量加于培养基明胶培养基亦应用较低温度灭菌血液、体液抗素等则应菌操作技术抽取加入于经冷却约50°C左右培养基

  琼脂斜面培养基应灭菌立即取冷至55℃-60℃摆置适斜面待其自凝固

  9、培养基质量测试

  每批培养基制备应仔细检查遍发现破裂、水浸入、色泽异、棉塞培养基沾染等、均应挑弃并测定其终pH

  全部培养基放入36±1°C恒温箱培养夜发现菌即弃

  用关标准菌株接种1~2管或瓶培养基培养24~48菌或应追查原并重复接种结仍同前则该批培养基即应弃能使用

  10、培养基保存

  培养基应存放于冷暗处能放于普通冰箱内放置间宜超周倾注平板培养基宜超3每批培养基均必须附该批培养基制备记录副页或明显标签