其实办法很简单的,培养基就按目标菌来配(需要什么细菌就配对应的培养基),灭菌后以无菌操作把细菌接种进去,然后在滴加无菌石蜡油,高度为1cm,这样石蜡油浮在培养基表面,把空气隔绝，这样就让培养基里成为无氧的条件了.
最典型的实验是O/F试验,用来判断细菌是需氧型还是无氧发酵型
不过特别说明的是,绝大多数厌氧培养的细菌并不需要绝对的无氧,只需要氧气少到一定程度就可以了,比如脑膜炎奈瑟菌、空肠弯曲菌、结核杆菌、产气荚膜梭菌，部分细菌对二氧化碳也有要求，比如脑膜炎奈瑟菌
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