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标准菌株有哪些种类?它的复壮步骤是这样的!

作者:乐诊生物技术发布时间:2021-12-25 17:09:20浏览量:0
    贮藏中心测定菌株为零代。在开启之后,该菌株被分成两个部分,一个用来保存菌种,另一个用来传用。可用于种苗的分批不超过5代。一般将其接种于半固体培养基中,在生长后用石蜡封存。那么标准菌株有哪些种类?它的复壮步骤是这样的!一起来看看!
 

 

标准菌株有哪些种类?

 
    1、标准菌株:至少一属或一种,直接从官方菌种保存局取得并界定。一般情况下,0代为好。
 
    2、标准储备菌株:在实验室转代后得到的一整套完全相同的独立菌株。常为第一代或第二代菌株。
 
    3、贮藏菌株:从一代标准贮藏菌株转移获得的培养。一般为二、三代。
 
    4、工作菌种:一种获得的菌株是通过一种标准的储备菌种,储存菌种或标准(已证实或未经证实)转移。一般为3-5代。
 

 

标准菌株复壮步骤:

 
    1、打开干净的台面。以75%的酒精擦拭外壁,使其自然干燥。在安瓿的上方用一个小砂轮划一条线,用手轻轻地打碎安瓿(安瓿加热时要小心,因为安瓿加热会破裂)。
 
    2、将0.5~0.8ml上述制备好的液体培养液用无菌吸管移入安瓿。轻轻地转动安瓿,将冻干菌种与液体培养液充分混合后完全溶解。使用无菌吸管法,将安瓿内的菌液全部转移至相应的液体培养基。
 
    3、将菌种按安瓿上标出的不同菌种进行适当温度培养(细菌培养温度为30~35℃,培养18~24小时;真菌培养温度为23~28℃,培养时间为3~5天。为细菌复苏生长提供依据,如无混浊,应延长培养时间至7天,真菌培养时间延长至14天。如无混浊,应消毒。
 
    4、黑曲霉菌悬液在室温下溶化,用无菌吸管吸收管内液体1~2滴,改善马丁琼脂斜面,用吸管均匀涂抹,23~28℃培养5~7天。倾斜正面为深褐色厚绒状,色泽均匀,无杂色,斜侧面无色,接近菌层培养基略呈黄色。经证实,用0.05%(ml/ml)的0.9%无菌氯化钠溶液洗脱,其中吐温80含量为0.05%(ml/ml)。
 
    5、复苏后,取8-10ml菌液至液体培养基,按g项复壮。用无菌工艺将100ml20%无菌甘油混合,1-2ml/管分装于冷冻管内。每10个样品配制一批,依次编号,后一条作为质控管,即相应的质控。
 

 
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